TMB作为过氧化氢酶底物用在ELISA 反应中,该底物能产生可溶性淡蓝色的末端产物,能在370 或 620-650 nm用分光光度计读取。TMB反应可以用2 M H2SO4 (产生黄色)终止, 并能在450 nm读取。因此TMB是测定血液、检测血红素(hemoglobin)和过氧化物酶的灵敏和特定试剂。