2×HYKGCBuffer（with4mMMgSO4）

 概述

    2×HYK GC Buffer（with 4mM MgSO₄）是使用Long Taq DNA Polymerase扩增具有复杂的二级结构模板（例如GC Rich、重复序列等）时的推荐PCR反应Buffer；该产品与华因康 Long Taq DNA Polymerase（EN1011S/EN1011L）中附带的2×HYK GC Buffer（with 4mM MgSO₄）完全相同。

保存

   -20℃低温保存。

产品应用

    配合HYK Long Taq DNA Polymerase（EN1011S/EN1011L）扩增具有复杂的二级结构模板（例如GC Rich、重复序列等）。

注意事项

1. 使用2×HYK GC Buffer（with 4mM MgSO₄）进行PCR扩增时，建议使用Tm值较高的引物。
2. 在常规PCR Buffer扩增失败情况下，使用本公司的2×HYK GC Buffer（with 4mM MgSO₄），成功扩增2031bp的GC含量在70%的DN**段。
3. PCR的反应体系请在冰上配制，然后置于预热至变性温度下的PCR反应仪上进行PCR反应，可增强PCR扩增的特异性。
4. 由于2×HYK GC Buffer和一般的PCR用Buffer相比DNA变性效果较强，因此简单的DNA 模板使用2×HYK GC Buffer（with 4mM MgSO₄）进行PCR扩增时，有时会降低PCR的扩增效率，此时推荐用常规的PCR Buffer。

应用实例

以Thermus thermophilus菌液为模板扩增DN**段（2031bp、GC含量70%）。

1. 反应体系如下：

组分	用量
Thermus thermophilus菌液	0.3μl
Forward Primer	10pmol
Reverse Primer	10pmol
dNTP（10mM each）	1μl
2×HYK GC Buffer	25μl
Long Taq DNA Polymerase（5U/μl）（EN1011）	0.25μl
ddH2O	Up to 50μl

2. PCR反应条件：

温度	时间	循环数
94℃	7min	1
94℃	30s	30
58℃	30s
72℃	2min
72℃	10min	1
4℃	∞	1

 3. 结果：