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用于在大肠杆菌中表达的载体

  • 进口
    Strep-tagÒ 载体概览:

      IBA提供多种用于在大肠杆菌中表达的pASK-IBA载体以便携带有Strep-tag的重组蛋白表达。除了抗生素抗性基因(AmpR, CamR),pASK-IBA载体仅在XbaI和HindIII限制性酶切位点之间有区别。其区别如下图所示:您可以在N-或C-端标签之间、细胞质外周表达或细胞质表达之间和/或用以去除标签的内蛋白酶切割位点(Factor Xa, enterokinase, thrombin 和 TEV protease)之间作选择。请注意,通常无须去除标签。

     

    双标签和6xHistidine-tag载体概览:

      除了Strep-tagÒ 载体,IBA还提供带有Strep-tag和6xHistidine-tag的双标签载体以及6xHistidine-tag载体。一个蛋白质上的两个不同标签能产生最高的纯化因素,使得可以在变性或生理条件下纯化全长蛋白质。而且,直接从培养基开始的纯化操作可以被优化。

      载体仅在XbaI和HindIII限制性酶切位点之间有区别。

     

    哺乳动物表达载体

      IBA的pEXPR-IBA载体是专为哺乳动物细胞中高水平表达和纯化重组Strep-tagÒ和/或 6xHistidine-tag融合蛋白而设计的。这些载体的克隆策略相同,因而与相应的细菌pASK-IBA质粒相兼容。因此,一个PCR片段可以被平行克隆进pASK-IBA及其相等的pEXPR-IBA。人巨细胞病毒(CMV)立早启动子在很多哺乳动物细胞中提供强表达。为了延长在转染细胞中表达的时间,载体会在潜伏感染了SV40大T-抗原(如COS7)的细胞系中复制。此外,新霉素抗性基因可以允许直接筛选稳定的细胞系。

     









































    pEXPR-IBA 特点

    益处

    Strep-tag II

    采用Strep-Tactin基质纯化重组蛋白

    CMV 立早启动子/增强子

    在多种哺乳动物细胞中高水平表达

    多克隆位点

    插入目标基因并与Strep-tag和/或6xHistidine-tag融合。与pASK-IBA载体兼容

    新霉素抗性基因

    在哺乳动物细胞中筛选稳定的转染子

    氨卞青霉素抗性基因

    E. coli中筛选

    pUC复制起始位点

    E. coli中高拷贝复制

    BM40 (仅见于pEXPR-IBA42 和44 )

    使蛋白质分泌进培养基中

    Factor Xa, thrombin (thb), enterokinase (ent) ,TEV protease (TEV)切割位点

    如果需要可以除去Strep-tag(一般不需要)