胰蛋白月示-亚硫酸盐-琼脂培养基(TryptoseSulfiteAgar)

上海楚柏Truelab是广东环凯微生物产品和水质检测产品的上海区域代理商。024045  胰蛋白月示 -亚硫酸盐-琼脂培养基(Tryptose Sulfite Agar)用于城市供水中滤膜法测定亚硫酸盐还原厌氧菌（梭状芽孢杆菌）孢子。（中华人民共和国城镇建设行业标准CJ/T 149—2001）

 

原理：胰蛋白胨、大豆蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子；焦亚硫酸钠和柠檬酸铁铵为硫化氢指示剂；梭状芽孢杆菌将焦亚硫酸钠还原为硫化氢，与铁离子结果形成黑色沉淀。

 

配方（每升）：             

胰蛋白月示	15g
大豆蛋白胨	5g
酵母膏粉	5g
焦亚硫酸钠（Na2S2O5）	1g
柠檬酸铁铵	1g
琼脂	15g

最终pH7.6±0.2

 

使用方法：

1、称取本品42g，加入1000 mL蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃灭菌15分钟，待冷至50℃左右倾注平皿。

2、滤膜灭菌将滤膜放入烧杯中，置于沸水中煮沸灭菌三次，每次15分钟。前两次煮沸后需要更换水洗涤2-3次，以除去残留溶剂。

3、滤器灭菌视滤器质地采用干热（酒精棉球火焰）或湿热灭菌。

4、孢子的选择水样在试验前须放置于水浴锅中，75±1℃加热15分钟。用同样的水样瓶作空白，用温度计检查加热温度。

5、接种与培养水样的过滤量要适当：对于饮用水、泉水、井水、海水、地面水和梭状芽孢杆菌轻度污染的水，取100mL过滤；对污染严重的水或废水，可用无菌水稀释后检测。调配一定的稀释度，使在滤膜上生长的黑色菌落分离，而更易于计数。

水样过滤后，用无菌镊子将滤膜过滤面朝下，置于培养皿中，同时使滤膜下无气泡。小心地将18mL约50℃的培养基倾注于培养皿中的膜上。在形成培养基层后，37±1℃培养20±4h和44±4h。如果使用厌氧培养箱，滤膜可放置在琼脂面上，且滤膜面向上。

6、观察结果。培养20±4h和44±4h后，计数所有黑色菌落。

7、分析结果的表述试验报告应说明所使用的方法，单位体积水样中亚硫酸盐还原厌氧细菌培养44±4h的孢子；孢子数太多，黑色菌落连在一起而难以计数，可采用20±4h培养时间的孢子大约数目。结果以CFU/100mL计。



质量控制：质控菌株接种后于37±1℃培养24—48h，结果如下：

菌名	菌号	生长状况	培养特征
产气荚膜梭菌	HK9051	良好	黑色菌落
破伤风梭菌	HK9041	良好	黑色菌落

贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规格：250g