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结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)(VioletRedBileGlucoseAgar)

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    上海楚柏Truelab是广东环凯微生物产品和水质检测产品的上海区域代理商。022222   结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)(Violet Red Bile Glucose Agar)用于阪崎肠杆菌的选择性分离培养以及肠道菌的计数和鉴别(SN标准)。
     
    原理;蛋白胨和酵母抽取物提供碳氮源和微量元素;乳糖和葡萄糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂。
     
    配方(每升):
    酵母抽取物 3.0g
    蛋白胨 7.0g
    氯化钠  5.0g
    3号胆盐  1.5g
    乳糖 10.0g
    葡萄糖 10.0g
    中性红  0.03g
    结晶紫 0.002g
    琼脂 15.0g
    最终pH 7.4±0.2
     
    使用方法:
    1、称取本品51.5g,加入蒸馏水或去离子水1.0 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,备用(不得超过3h)。
    2、取奶粉样品333.0克按MPN三管法分别取100.0克、10.0克和1.0克分装在各三个2000.0ml、250.0ml和100.0ml的三角瓶中,在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10(样品为1/10)的无菌蒸馏水,摇匀,在36±1℃培养18~22小时(SN和FDA方法)。
    3、各取10.0ml上述悬浮液加到装有90.0mlEE肉汤(022160)的150.0ml的三角瓶中,在36±1℃增菌培养18~22小时。
    4、用划线或涂布法把混匀的EE肉汤接种到VRBGA琼脂平板上,36±1℃培养18~22小时。
    5、从VRBGA平板上挑取5个可疑菌落分别接种到5个TSA平板,25±1℃培养48~72小时。
    6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似阪崎肠杆菌菌落进行生化鉴定。
    7、奶粉以外的其它样品,以无菌手续取样品25.0g或25.0mL,加入含225.0mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基。
    8、观察结果。
     
    质量控制:本品倾注平皿后呈暗紫红色,下列菌株接种后于36±1℃培养18~24h生长情况如下表。
    菌名 菌号  生长状况 培养特征
    大肠埃希氏菌    ATCC25922 良好  红色菌落周围有紫红色晕
    阪崎肠杆菌 ATCC51329  良好 红色菌落周围可有紫红色晕
    鼠伤寒沙门氏菌 CMCC50115 良好 红色菌落周围可有紫红色晕
    福氏志贺氏菌 CMCC51572 良好 红色菌落周围可有紫红色晕
    金黄色葡萄球菌 ATCC6538 受抑制 -----
     
    贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
    规格:250g