甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础（MYP）(MannitolYolkPolymyxinAgarBase)
上海楚柏Truelab是广东环凯微生物产品和水质检测产品的上海区域代理商。028380 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础（MYP）(Mannitol Yolk Polymyxin Agar Base)用于蜡样芽孢杆菌的菌数测定及分离培养(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，参考SN0176-92)。
原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子；D—甘露醇为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH指示剂；卵黄含有卵磷脂，蜡样芽孢杆菌产生卵磷脂酶，在菌落周围产生沉淀环；并不发酵D—甘露醇产酸使菌落显红色；多粘菌素B可抑制杂菌的生长。
配方（每升）：
最终 pH7.4±0.2
使用方法： （平板计数法）
1、称取本品46g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，每瓶100mL，121℃灭菌15分钟。
2、用时加热溶化琼脂，冷至50℃后，每100mL培养基基础中加入配套试剂1支 (SR0170)( 多粘菌素B10000IU) 和50%卵黄液5mL，混匀后倾注灭菌培养皿。
3、样品的制备。以无菌操作将检样25g（mL）用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液做成10-1—10-5的稀释液。
4、取各稀释液0.1mL接种到MYP琼脂平板上，用灭菌L形玻璃棒均匀涂布于整个琼脂表面。每稀释度接种两个MYP琼脂平板。
5、将平板置于36±1℃培养12－20h。
6、选取适当菌落的平板进行计数。并计算同一稀释度两个平板的平均菌落数。蜡样芽孢杆菌在MYP平板上生成的菌落为粉红色，环绕产生卵磷脂酶沉淀环。如反应不典型，可继续培养24h再计数。
7、计数后从每个平板上选取5个已计数的菌落，按有关操作进行证实实验。
8、根据证实实验确定为蜡样芽孢杆菌的菌落数，按比例计算出该皿内的蜡样芽孢杆菌菌落数，然后乘其稀释倍数，即得每克（或mL）样品所含蜡样芽孢杆菌数。例如MYP平板的可疑菌落为25个，取5个鉴定，证实为4个，乘上稀释倍数（如10-4），再乘上1 g（或mL）检样数（取的是0.1mL样）则为：
25×4／5×10-4×10＝2×106
附：50%卵黄液:
取鲜鸡蛋，用硬刷将蛋壳彻底洗净，沥干，放于70%酒精溶液中浸泡1h，以无菌操作取出卵黄，加入等量灭菌生理盐水，混匀后备用。
质量控制：质控菌株接种后于36±1℃培养24h，结果如下。
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规格：250g
参考文献：
1.GB/T4789.14－2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 蜡样芽孢杆菌检验
2.GB/T4789.28－2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂
3.SN/T 0176－92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法
原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子；D—甘露醇为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH指示剂；卵黄含有卵磷脂，蜡样芽孢杆菌产生卵磷脂酶，在菌落周围产生沉淀环；并不发酵D—甘露醇产酸使菌落显红色；多粘菌素B可抑制杂菌的生长。
配方（每升）：
| 蛋白胨 | 10g |
| 牛肉膏粉 | 1g |
| D—甘露醇 | 10g |
| 氯化钠 | 10g |
| 琼脂 | 15g |
| 酚红 | 0.025g |
使用方法： （平板计数法）
1、称取本品46g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，每瓶100mL，121℃灭菌15分钟。
2、用时加热溶化琼脂，冷至50℃后，每100mL培养基基础中加入配套试剂1支 (SR0170)( 多粘菌素B10000IU) 和50%卵黄液5mL，混匀后倾注灭菌培养皿。
3、样品的制备。以无菌操作将检样25g（mL）用灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液做成10-1—10-5的稀释液。
4、取各稀释液0.1mL接种到MYP琼脂平板上，用灭菌L形玻璃棒均匀涂布于整个琼脂表面。每稀释度接种两个MYP琼脂平板。
5、将平板置于36±1℃培养12－20h。
6、选取适当菌落的平板进行计数。并计算同一稀释度两个平板的平均菌落数。蜡样芽孢杆菌在MYP平板上生成的菌落为粉红色，环绕产生卵磷脂酶沉淀环。如反应不典型，可继续培养24h再计数。
7、计数后从每个平板上选取5个已计数的菌落，按有关操作进行证实实验。
8、根据证实实验确定为蜡样芽孢杆菌的菌落数，按比例计算出该皿内的蜡样芽孢杆菌菌落数，然后乘其稀释倍数，即得每克（或mL）样品所含蜡样芽孢杆菌数。例如MYP平板的可疑菌落为25个，取5个鉴定，证实为4个，乘上稀释倍数（如10-4），再乘上1 g（或mL）检样数（取的是0.1mL样）则为：
25×4／5×10-4×10＝2×106
附：50%卵黄液:
取鲜鸡蛋，用硬刷将蛋壳彻底洗净，沥干，放于70%酒精溶液中浸泡1h，以无菌操作取出卵黄，加入等量灭菌生理盐水，混匀后备用。
质量控制：质控菌株接种后于36±1℃培养24h，结果如下。
| 菌名 | 菌号 | 生长状况 | 培养特征 |
| 蜡样芽孢杆菌 | CMCC(B)63303 | 良好 | 菌落粉红色，周围有较大沉淀环 |
| 枯草芽孢杆菌 | CMCC(B)63501 | 良好 | 黄色菌落，无沉淀环 |
| 大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 不生长 | —— |
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规格：250g
参考文献：
1.GB/T4789.14－2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 蜡样芽孢杆菌检验
2.GB/T4789.28－2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂
3.SN/T 0176－92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法