引言
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是由镰刀菌特别是禾谷镰刀菌(F.
graminearum)产生的一种低分子量有毒代谢物,是一种单端孢霉烯族霉菌毒素,毒性很高,可导致免疫紊乱,还可引发猪拒绝进食及呕吐,因此又称为呕吐毒素。它广泛存在于自然界中,主要污染小麦、大麦和玉米。
检测范围
可定量检测粮食、谷物和其他农产品及饲料等样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量。
检测原理
Helica脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)检测试剂盒采用固相直接竞争性酶联免疫原理检测样品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇。微孔中包被有脱氧雪腐镰刀菌烯醇的特异性抗体,标准品或样品中的DON与DON酶标物竞争结合微孔中的抗体。孵育一定时间后,倾倒微孔中的内容物并通过洗涤去除非特异反应物。然后向微孔中加入酶底物(TMB),溶液变为蓝色。颜色强度与与DON酶标物的浓度成正比,与标准品或样品中DON的浓度成反比。最后加入终止液,颜色由蓝色转变为黄色。使用酶标仪在450nm下检测微孔中溶液的OD值。比较样品OD值与试剂盒提供的标准品的OD值,即可得出结果。
试剂盒组成
材料名称 | 规格 | 数量 |
微孔 | 置于微孔板中,共96个微孔(12条、8孔/条),包被有鼠抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇抗体 | 1袋 |
稀释孔(绿色) | 置于微孔板中,共96个微孔,未包被抗体(12条、8孔/条) | 1板 |
DON标准品 | DON的有机溶液,每瓶1.5mL,浓度依次为:0,10,20,50,100和200ng/mL | 6瓶 |
DON酶标物 | DON与过氧化物酶结合,溶于含防腐剂的缓冲液中,每瓶12mL | 2瓶 |
底物试剂 | 15mL,稳定的四甲基联苯胺(TMB) | 1瓶 |
终止液 | 15mL,酸性溶液 | 1瓶 |