引言
黄曲霉毒素是多种霉菌(如黄曲霉和寄生曲霉)产生的有毒代谢物,主要包括四种亚型(黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2,其中B1毒性最强,是主要的检测类型,但若其他类型的浓度较高,同样具有很大危害性)。它存在于谷物、坚果、棉花籽及其他食品或饲料中,具有致癌性,可导致人罹患肝癌、黄曲霉毒素中毒、瑞氏综合症和其他慢性疾病;动物可通过进食被污染的饲料接触到黄曲霉毒素。因此,大多数国家都限制食品或饲料中黄曲霉毒素B1的含量。
检测范围
可定量检测粮食、坚果、咖啡豆、谷物及其加工制品、其他商品及饲料中黄曲霉毒素B1含量。
检测原理
HELICA黄曲霉毒素B1检测试剂盒采用固相直接竞争性酶联免疫原理。微孔中包被有对黄曲霉毒素B1具有高亲和力的抗体。黄曲霉毒素B1酶标物与标准品或样品中的黄曲霉毒素B1竞争结合微孔中包被的抗体。孵育一定时间后,倾倒微孔中的内容物,洗涤非特异反应物。随后加入底物试剂,溶液变为蓝色。颜色强度与黄曲霉毒素B1酶标物的量成正比,与样品或标准品中黄曲霉毒素B1的浓度成反比。最后加入酸性终止液,终止反应并将微孔中溶液颜色变为黄色。使用酶标仪在450nm下检测微孔中溶液的OD值。比较样品OD值与试剂盒提供的标准品的OD值,即可获得检测结果。
试剂盒组成
材料名称 | 规格 | 数量 |
微孔 | 置于微孔板中,共96个微孔(12条、8孔/条),包被有鼠抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体 | 1袋 |
稀释孔(绿色) | 置于微孔板中,共96个微孔,未包被抗体(12条、8孔/条) | 1板 |
黄曲霉毒素B1标准品 | 溶于有机溶剂中,浓度依次为:0.0,0.2,0.5,1.0,2.0和4.0ng/mL,每瓶1.5mL | 6瓶 |
黄曲霉毒素B1酶标物 | 黄曲霉毒素B1与辣根过氧化物酶的结合物,溶于含防腐剂的缓冲液中,每瓶25 mL | 1瓶 |
底物试剂 | 15 mL,稳定的四甲基联苯胺(TMB) | 1瓶 |
终止液 | 15 mL,酸性溶液,即用型 | 1瓶 |