上海楚柏Truelab是广东环凯微生物产品和水质检测产品的上海区域代理商。022225 结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG) (Violet Red Bile Agar-MUG)用于食品中大肠杆菌的平板计数。(GB/T 4789.38-2008)
原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂;琼脂为凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
配方(每升):
蛋白胨 | 7g |
酵母膏粉 | 3g |
乳糖 | 10g |
氯化钠 | 5g |
3号胆盐 | 1.5g |
中性红 | 0.03g |
结晶紫 | 0.002g |
琼脂 | 15g |
MUG | 0.1g |
最终pH 7.4±0.2
使用方法:
1、称取本品41.6g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,无需高压灭菌,备用。
2、以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择2~3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基,琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板表层。
3、36±1℃培养18—24h。
4、观察菌落形态,并于暗室中用360nm~360nm波长紫外灯照射,计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。
质量控制:
质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下:
菌 名 | 菌 号 | 生长状况 | 培养特征 |
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 良好 | 有荧光,深红色菌落,周围有红色沉淀 |
产气肠杆菌 | CMCC(B)45103 | 良好 | 无荧光,红色菌落,周围可有淡红色沉淀 |
粪链球菌 | CMCC32223 | 受抑制 | ----- |
贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规格:100g